1、問(wèn): 做無(wú)菌驗(yàn)證時(shí)陽(yáng)性對(duì)照菌是怎么加入的?可以在加完培養(yǎng)基后用無(wú)菌的注射器把菌液注入嗎?
答:嚴(yán)格的說(shuō)是要在zui后一遍沖洗液中加入陽(yáng)性對(duì)照菌的,這主要是考量濾膜對(duì)于陽(yáng)性菌的截留性~但是濾器如果可以提供濾膜對(duì)于陽(yáng)性菌的充分截留的話在zui后的培養(yǎng)體系中加入陽(yáng)性菌也是未嘗不可的. 如果供試品沒(méi)有抑菌作用,可以在加完培養(yǎng)基后用無(wú)菌的注射器把菌液注入,搖勻如果供試品有抑菌作用,正如安哥洛卡所講,在zui后一次沖洗液中加入陽(yáng)性對(duì)照菌,搖勻,抽慮,加培養(yǎng)基. 無(wú)菌檢查,加入陽(yáng)性的方法可以有許多種,可以根據(jù)個(gè)人的習(xí)慣。只是注意:1、避免人為污染。2、陽(yáng)性菌加入數(shù)量,關(guān)鍵詞:陽(yáng)性對(duì)照菌
2、問(wèn): 離心沉淀法的原理、操作和注意事項(xiàng)是什么?
答:原理:利用沉降系數(shù)的差異將供試品和微生物進(jìn)行分離;
操作:取規(guī)定量的供試液,3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘(供試液如有沉淀,先以500轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取全部上清液再離心),棄去上清液,留底部集菌液約2ml,加稀釋劑至原規(guī)定量.
注意事項(xiàng):真菌由于沉降系數(shù)比較小, 500r/min離心5min,黑曲霉、白色念珠菌回收率為20%,因此其檢查不適宜用低速離心沉淀法.
關(guān)鍵詞:離心沉淀法
3、問(wèn): 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)的微生物及無(wú)菌檢查,是否每次都要做?
答:是;
原因: 一 實(shí)驗(yàn)期內(nèi)可能會(huì)染菌;
二 滅菌后微生物并不是就*"死亡",有些成為碎片,這些碎片在一定的條件和時(shí)間下,可以自我修復(fù)而復(fù)活.
三 穩(wěn)定性的考察,也應(yīng)包括藥品有效期的考察,在此期間所有的項(xiàng)目都應(yīng)是合格的,無(wú)菌也是其中之一,如果在有效期內(nèi)無(wú)菌不合格,也可以說(shuō)明該藥品存在一定的缺陷,至少,有效期有問(wèn)題。
關(guān)鍵詞: 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
4、問(wèn):眼部給藥制劑如何做衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)?
答:液體制劑:無(wú)菌檢查;
半固體及固體制劑:微生物限度檢查
關(guān)鍵詞: 眼部給藥制劑
5、問(wèn):滴眼液的微生物限度為何進(jìn)行無(wú)菌檢查?
答: 一 滴眼劑產(chǎn)品系按照無(wú)菌工藝生產(chǎn)且終產(chǎn)品為滅菌產(chǎn)品,故其成品的微生物質(zhì)量應(yīng)要求統(tǒng)一為無(wú)菌;所以,滴眼劑產(chǎn)品的臨床合理用藥應(yīng)與其衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求一致,即將其微生物質(zhì)量要求統(tǒng)一為無(wú)菌,顯然更為合理;
二 滴眼劑的微生物質(zhì)量要求為無(wú)菌,是與各國(guó)藥典在滴眼劑要求上的統(tǒng)一,及對(duì)《中國(guó)藥典》此項(xiàng)規(guī)定合理性的補(bǔ)充及完善等方面看,滴眼劑成品的微生物質(zhì)量要求統(tǒng)一為無(wú)菌具有必要性。
三 同時(shí),中國(guó)已加入WTO,進(jìn)出口藥品已有明確質(zhì)量要求(在國(guó)外藥典中,眼用藥品都以無(wú)菌要求),同時(shí)臨床用藥更加合理與規(guī)范。
故現(xiàn)行藥典將滴眼劑的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一為強(qiáng)制性無(wú)菌要求。
關(guān)鍵詞: 滴眼液 無(wú)菌檢查
6、問(wèn):如何進(jìn)行滅菌驗(yàn)證?
答: 可用生物指示劑進(jìn)行驗(yàn)證,
濕熱滅菌:濕熱脂肪芽孢桿菌孢子
干熱滅菌:枯草芽孢桿菌孢子
7、問(wèn):為何潔凈度沉降菌的檢查只用營(yíng)養(yǎng)瓊脂?
答:一 玫瑰紅鈉培養(yǎng)基對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)有抑制作用,而營(yíng)養(yǎng)瓊脂對(duì)于真菌的生長(zhǎng)則沒(méi)有抑制作用,所以選用營(yíng)養(yǎng)瓊脂作為培養(yǎng)基
二 營(yíng)養(yǎng)瓊脂主要為培養(yǎng)細(xì)菌,而且培養(yǎng)時(shí)間是2天,原因?yàn)榧?xì)菌為原核生物,生長(zhǎng)與繁殖的能力較霉菌等真核生物強(qiáng),所以控制了細(xì)菌,霉菌等真菌也在一定程度上也得到了控制
三 廠家在制定自己的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)時(shí),可以同時(shí)對(duì)細(xì)菌和真菌進(jìn)行控制.
關(guān)鍵詞:沉降菌
8、問(wèn): 微生物培養(yǎng)時(shí)間范圍如何界定?
答: 含量測(cè)定所允許的誤差為±2%,如果照此限度,無(wú)菌培養(yǎng)時(shí)間為14天*24小時(shí)/天=336小時(shí),它的2%為6.72小時(shí),前后共13.44小時(shí);又加上無(wú)菌檢驗(yàn)沒(méi)有必要達(dá)到含量測(cè)定所要求的精度,所以我們*可以在培養(yǎng)的第十四天的任何上班時(shí)間觀察結(jié)果下結(jié)論.微生物限度檢查培養(yǎng)時(shí)間分別為48小時(shí)及72小時(shí), 它們的2%分別為0.96小時(shí),1.44小時(shí),即我們只能在準(zhǔn)確培養(yǎng)時(shí)間的前后1~2小時(shí)內(nèi)計(jì)數(shù).
關(guān)鍵詞: 微生物培養(yǎng)時(shí)間
9、問(wèn):抗生素乳膏,需加聚山梨酯80、司盤(pán)、單硬脂酸甘油酯乳化,后離心集菌(離心后不分層),再薄膜過(guò)濾。但基質(zhì)堵住膜孔,過(guò)濾速度非常慢,怎么辦?
答:1、可以用十六烷酸異丙酯萃取基質(zhì),使之分層,取水層進(jìn)行薄膜過(guò)濾(回收率差)。
2、樣品加入吐溫-80,乳化(45度)-----薄膜過(guò)濾。
關(guān)鍵詞:抗生素乳膏、十六烷酸異丙酯、萃取、吐溫-80、乳化(45度)、薄膜過(guò)濾
10、問(wèn):陶瓦蓋作用及使用范圍
答:陶瓦蓋的主要作用為防止菌落蔓延生長(zhǎng)成片或發(fā)生重疊影響計(jì)數(shù),通常在在效價(jià)測(cè)定中使用,在微生物限度檢查中僅在易形成片狀菌某些劑型如蜜丸、水丸中使用.
關(guān)鍵詞:陶瓦蓋
11、問(wèn):如何根據(jù)消毒物品的特性確定合格的滅菌時(shí)間和溫度?
答:一般情況下,含有糖分的培養(yǎng)基溫度需控制在115℃15~20min,不含糖分的培養(yǎng)基溫度控制在121℃15~20min,而含菌的培養(yǎng)基(使用過(guò))溫度需控制在121℃30min左右 ,此外每次使用時(shí),應(yīng)放入必要的監(jiān)視指標(biāo)。
關(guān)鍵詞:滅菌時(shí)間 溫度
12、問(wèn):如何減少培養(yǎng)基靈敏度下降引起的誤差? 答:目前大多數(shù)單位使用干粉培養(yǎng)基,使用較方便,但由于其極易吸潮,如存放不當(dāng)出現(xiàn)凝塊,則其凝固性較差,應(yīng)避免使用。新鮮配制的培養(yǎng)基應(yīng)在2℃~20℃避光保存,但不得凍結(jié),保存時(shí)間不得過(guò)2周。硫乙醇鹽流體培養(yǎng)基儲(chǔ)存過(guò)程中,若氧化還原層超過(guò)1/5,須經(jīng)水浴加熱煮沸10min方可使用,但只限一次。否則可使培養(yǎng)基中糖、微生 物和氨基酸受到破壞,影響質(zhì)量
關(guān)鍵詞:培養(yǎng)基靈敏度
13、問(wèn):如何控制細(xì)菌的培養(yǎng)時(shí)間?
答:不同的培養(yǎng)時(shí)間對(duì)樣品細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)結(jié)果的影響 樣品經(jīng)24h培養(yǎng)后,有的菌落很小,容易漏掉,培養(yǎng)48h后,菌落不但變大,而且還有很多新生長(zhǎng)出來(lái)的菌落,培養(yǎng)72h后,菌落數(shù)增加不多,但菌落明顯變大,而且混雜的霉菌生長(zhǎng)旺盛,影響結(jié)果的觀察計(jì)數(shù)。同時(shí)這也是一些樣品經(jīng)72h培養(yǎng)后細(xì)菌總數(shù)技術(shù)有明顯增加的一個(gè)原因。培養(yǎng)24h和培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)結(jié)果有明顯差異,后者合格率明顯降低,所以在規(guī)定的培養(yǎng)環(huán)境下,應(yīng)嚴(yán)格遵守培養(yǎng)時(shí)間,以便真實(shí)的反映出樣品中細(xì)菌總數(shù)的水平。
關(guān)鍵詞:細(xì)菌 培養(yǎng)時(shí)間
14、問(wèn):菌種保藏與管理應(yīng)執(zhí)行哪些程序?
答:菌種保藏與管理應(yīng)有完整的程序,保藏的菌種必須具備該菌種的詳細(xì)歷史及有關(guān)資料。一般是首先填寫(xiě)菌種卡片,登記菌種名稱(chēng)編號(hào),來(lái)源歷史,形態(tài)特征,生化與血清學(xué)鑒定,以及菌種傳代次數(shù)、zui宜培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件、保藏方法、貯存條件及保藏地址等
關(guān)鍵詞:菌種保藏與管理
15、問(wèn):青霉素酶的保存條件及溫度對(duì)其活性的影響
答:青霉素酶能夠在4℃保存6 個(gè)月以上活性不發(fā)生顯著改變。與同時(shí)采用的加入甘油或增加氯化鈉濃度保護(hù)酶活性的方法比較, 沒(méi)有顯著的不同;
溫度對(duì)青霉素酶的活性影響很大。55 ℃時(shí)對(duì)青霉素G呈現(xiàn)zui高水解活性, 隨著溫度的升高或降低, 酶水解活性逐漸下降。緩沖液pH 對(duì)酶活性存在一定的影響, zui適酸堿度為 pH 7.0 ,在應(yīng)用本酶進(jìn)行青霉素制劑無(wú)菌檢查等應(yīng)用時(shí), 需特別注意測(cè)試溫度及酸堿度的影響.
關(guān)鍵詞:青霉素酶 保存
16、問(wèn):標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間
按F0=Ft * 10(t-121)/10計(jì)算,F0要大于8,在160--170度是短時(shí)間就能做到的,為什么干熱滅菌要兩小時(shí)以上呢?
答:濕熱滅菌和干熱滅菌的效果是不同的, 飽和蒸汽的穿透性比干熱空氣穿透強(qiáng)得多,蒸汽冷凝時(shí)放出的潛熱傳給待滅菌品,使之升溫并使待滅菌品所帶的微生物尤其是表面的微生物發(fā)生水合作用, 從而加速了它們的死亡。所以在達(dá)到同樣滅菌效果的前提下,濕熱滅菌所需要的時(shí)間要短得多。
(公式 F0=Ft * 10(t-121)/10 只適合于濕熱滅菌 ,F0系T=121℃及Z=10℃下的FT值。如果把121℃理解為“標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)”,那么F0可理解為“標(biāo)準(zhǔn)滅菌值”)
關(guān)鍵詞:滅菌時(shí)間、濕熱滅菌、干熱滅菌
17、問(wèn):驗(yàn)證是不是要3批樣品的一次,還是一批樣品的3次,還是3次樣品3次得實(shí)驗(yàn)?
答:1、驗(yàn)證的目的,是要考察實(shí)驗(yàn)方法的可行性(避免出現(xiàn)假陽(yáng)性、假陰性),
2、在樣品的藥物組成、成份、給藥途徑一致的前提下,驗(yàn)證時(shí),“同一個(gè)批號(hào)的做3次”或“3個(gè)批號(hào)的各做一次”,均可。
關(guān)鍵詞:驗(yàn)證、3次、1次
18、問(wèn):做實(shí)驗(yàn)的好習(xí)慣是什么?
答:1.實(shí)驗(yàn)前后清潔洗手,完畢清理實(shí)驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng),器皿洗凈歸原,儀器等電源關(guān)閉。 2.試劑、樣品標(biāo)簽詳細(xì)準(zhǔn)確,包括劑量,規(guī)格,時(shí)間,實(shí)驗(yàn)人員等等;實(shí)驗(yàn)記錄詳細(xì)準(zhǔn)確,以便備查和分析。 3.提前分析實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及步驟,準(zhǔn)備好全部的試劑及相應(yīng)工具、儀器,不懂或者有疑問(wèn)的步驟和地方問(wèn)清楚,重點(diǎn)難點(diǎn)重點(diǎn)標(biāo)出,做到心中有數(shù);實(shí)驗(yàn)完畢及時(shí)分析。 4.科學(xué)計(jì)劃、合理分配時(shí)間,做到忙而不亂。實(shí)驗(yàn)中仔細(xì)觀察試驗(yàn)過(guò)程,及時(shí)記錄可疑或者需要注意的地方。 5.多讀文獻(xiàn)多與別人交流,開(kāi)拓思路,改進(jìn)方案,對(duì)于實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展及方向做到一定的把握。
關(guān)鍵詞:做實(shí)驗(yàn)、好習(xí)慣
19、問(wèn):限度檢查所用器皿用自來(lái)水洗后一定用純化水再洗嗎?
答:GMP認(rèn)證中關(guān)于QC的規(guī)程中"分析用玻璃器皿清潔規(guī)程"要求如下
1.0目的 提供玻璃器皿的清潔方法的文件指導(dǎo)。 2.0范圍 化驗(yàn)室部門(mén)所有玻璃器皿。 3.0責(zé)任 化驗(yàn)室人員。 4.0程序 4.1 玻璃器皿每次使用后,使用者必須使其清潔并放于固定位置備用。 4.2 一般玻璃器皿清潔,用飲用水或去污劑洗滌后,器壁應(yīng)不掛水珠,再用少量純化水沖洗器皿三次,放固定位置自然干燥。 4.3 定量分析用玻璃器皿(如滴定管;移液管等)清潔,先把器皿內(nèi)的水瀝掉,然后往其中加入洗液,浸泡一段時(shí)間,放掉洗液,用飲用水沖洗后,再用純化水沖洗三次,倒置自然干燥。 4.4 水分測(cè)定用的玻璃器皿清潔過(guò)程同1或2,清潔后置于105~107℃烘箱內(nèi)烘干。然后存放于干燥器中。
關(guān)鍵詞:限度檢查、器皿、純化水
20、問(wèn):潔凈室甲醛氣體熏蒸消毒驗(yàn)證方案是什么?
答:1、 甲醛消毒方法
在所有的消毒液中甲醛zui常用。當(dāng)相對(duì)濕度在65%以上、溫度在24~40℃時(shí),甲醛氣體的消毒效果,但若采用過(guò)多的甲醛,會(huì)因聚合而析出白色粉未附在建筑物或設(shè)備表面。一般甲醛的消毒方法如下:
A:消毒前先用絲綢浸注射用水(純化水)擦洗房間建筑物和設(shè)備表面,然后用5%麝香草酚溶液噴酒或擦洗,靜置1小時(shí)后,再用絲綢浸注射用水(純化水)擦洗一次。
B:計(jì)算體積(包括房間及風(fēng)管體積),按10ml/m3的比例準(zhǔn)備濃度為36%的甲醛溶液(甲醛密度為1.1g/ml),按2~3g/m3的比例準(zhǔn)備高錳酸鉀溶液。
C:在房間中放入試驗(yàn)裝置,如不銹鋼培養(yǎng)皿支架;直徑90mm雙碟玻璃培養(yǎng)皿;枯草桿菌試紙,每張?jiān)嚰埳峡莶輻U菌數(shù)量為1*106個(gè),每個(gè)培養(yǎng)皿中放2張?jiān)嚰垼?/span>1張做無(wú)菌試驗(yàn),1張做含菌數(shù)試驗(yàn)。培養(yǎng)皿的數(shù)量應(yīng)根據(jù)房間面積確定。
D:消毒流程:在不銹鋼容器中加入高錳酸鉀,用雙層紗布蓋住桶口,再倒入36%濃度的甲醛溶液 甲醛氣體擴(kuò)散(約30min) 啟動(dòng)空調(diào)器讓甲醛氣體循環(huán)(約20min) 關(guān)閉通風(fēng)系統(tǒng),房間熏蒸消毒,不少于7hr 房間排氣,用新鮮空氣置換(約2hr) 開(kāi)啟空調(diào)系統(tǒng) 用75%酒精噴酒環(huán)境。
E:質(zhì)監(jiān)部門(mén)取樣培養(yǎng)。判斷標(biāo)準(zhǔn):試紙內(nèi)枯草桿菌數(shù)量小于1*103個(gè)為合格。
F:取樣后用絲綢沾0.1%的新潔爾滅溶液擦洗機(jī)器表面;用0.1%新潔爾滅溶液或1%Germ Warfare溶液或75%酒精噴灑建筑物四周。0.1%新潔爾溶液與1%Germ Warfare溶液溶液每月輪換一次。
2、 氣體熏蒸滅菌后室內(nèi)環(huán)境中殘留量的測(cè)試
用甲醛氣體進(jìn)行熏蒸滅菌后,需用全新空氣換氣若小時(shí),由于甲醛的環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)只有(1~2)*10-6,要使環(huán)境中的殘留的甲醛濃度盡可能低至不致使人嗅出特殊氣味(<0.55*10-6>,并對(duì)眼睛無(wú)刺激(<1*10-6>,然后根據(jù)測(cè)定的室內(nèi)環(huán)境中甲醛殘留量的結(jié)果,正確設(shè)定換氣時(shí)間,以保證在達(dá)到作業(yè)環(huán)境中無(wú)菌的前提下,對(duì)人身心健康不致產(chǎn)生不良影響。
(1) 取樣方法及取樣量
在各取樣場(chǎng)所,用約30L的塑料袋收集室內(nèi)空氣,將袋內(nèi)空氣用吸收瓶、泵、氣流計(jì)等組成的裝置捕集至瓶?jī)?nèi)吸收液中(樣本數(shù)應(yīng)≧3)。
(2) 供試液的配制
取0.5%硼酸溶液20ml作為吸收液,用溶液吸收法,以1L/min的速度分別讓各取樣場(chǎng)所的空氣通過(guò)10min,然后將吸收液移至25.0ml的容量瓶中,加水使成25.0ml,即得。
(3) 試驗(yàn)操作
A:取供試液2.0ml至帶栓試管中,加5mol/L的NaOH溶液2.0ml及AHMT溶液2.0ml,輕搖數(shù)次混勻后,室溫放置20min。然后加KIO4溶液2.0ml,搖2~5min至無(wú)氣流生成為止;同時(shí)用水2.0ml同法制成對(duì)照液,在波長(zhǎng)550nm附近測(cè)zui大吸光度。
B:分別取甲醛標(biāo)準(zhǔn)液0、0.5、1.0、1.5、2.0ml,加水使成2.0ml,然后按A操作,測(cè)定吸光度,制出甲醛濃度(ug/ml)與吸光度的關(guān)系檢量線。
環(huán)境中的甲醛濃度(10-6)可由下式求出:
22.4 273+t
甲醛濃度(10-6)=aX-------------X25X---------
30.03 273V
式中 a------供試液中甲醛濃度,
V-----采樣氣體量,L
t-----采樣時(shí)平均溫度,℃
22.4-----1mol氣體在0、1個(gè)大氣壓(101.325kPa)下的體積,L;
30.03---- 甲醛相對(duì)分子質(zhì)量;
25-----供試液全量,ml。
(4) 試液準(zhǔn)備
A:甲醛標(biāo)準(zhǔn)液
a甲醛稀釋液:精取中國(guó)藥典中規(guī)定“甲醛溶液”1ml,加水準(zhǔn)確至200 ml作為甲醛稀釋液.精取10ml至碘瓶?jī)?nèi),確加入0.1mol/L碘液50ml,加1mol/L氫氧化鋰溶液20ml。避光放置15min后,加15ml的10%硫酸,用硫代硫酸鈉液(0.1mol/L)滴定。另用水10ml進(jìn)行空白試驗(yàn)。
(Va-Vb)X1.5013
甲醛稀釋液中的甲醛濃度(mg/ml)=------------------------------------
10
式中Va------甲醛稀釋液消耗0.1mol/L硫代硫酸鈉液量,ml;
Vb------空白試驗(yàn)消耗0.1mol/L硫代硫酸鈉液量,ml;
1.5013------1ml碘液(0.1mol/L)相對(duì)甲醛的量,mg;
10-------甲醛稀釋液取樣量,ml。
b:甲醛標(biāo)準(zhǔn)液:精取甲醛稀釋液,加水準(zhǔn)確稀釋1000倍,即得。
B:AHMT溶液
取4-氨基-3-肼-5-巰基-1,2,4-三唑0.5g,加0.2mol/L鹽酸100ml溶解,避光保存。需要說(shuō)明的是,用甲醛消毒時(shí)也有不加高錳酸鉀,而將甲醛直接放入空調(diào)器內(nèi)送入房間及用氨水中和的方法。不管采用什么方法,只要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證是可行的,都可以使用。
關(guān)鍵詞:潔凈室、甲醛氣體、熏蒸消毒
問(wèn):細(xì)菌室工作守則(微生物室SOP之一)是什么?
答:細(xì)菌室工作守則 1.每日工作前用紫外線照射實(shí)驗(yàn)室半小時(shí)以上。 2.入室前應(yīng)穿工作服,并做好實(shí)驗(yàn)前的各項(xiàng)準(zhǔn)備工作。 3.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保持肅靜,不準(zhǔn)吸煙、吃東西及用手觸摸面部。盡量減少室內(nèi)活動(dòng),以免引起風(fēng)動(dòng),無(wú)關(guān)人員禁入。 4.非必要物品禁止帶入實(shí)驗(yàn)室,必要資料和書(shū)籍帶入后,應(yīng)遠(yuǎn)離操作臺(tái)。 5.做好標(biāo)本的登記、編號(hào)及試驗(yàn)記錄。未發(fā)出報(bào)告前,請(qǐng)勿丟棄標(biāo)本。 6.標(biāo)本處理及各項(xiàng)試驗(yàn)應(yīng)在操作間進(jìn)行,接種環(huán)用完后應(yīng)立即火焰滅菌,沾菌吸管、玻片等用后應(yīng)浸泡在消毒液內(nèi)。 7.實(shí)驗(yàn)時(shí)手部污染,應(yīng)立即用過(guò)氧乙酸消毒或浸于3%來(lái)蘇兒溶液中5-10分,再用肥皂洗手并沖洗干凈;如誤入口內(nèi),應(yīng)立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,根據(jù)實(shí)際情況服用有關(guān)藥物。 8.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如污染了實(shí)驗(yàn)臺(tái)或地面,應(yīng)用3%來(lái)蘇兒覆蓋其上半小時(shí),然后清洗;如污染工作服,應(yīng)立即脫下,高壓滅菌。 9.若出現(xiàn)著火情況,應(yīng)沉著處理,切勿慌張,立即關(guān)閉電閘,積極滅火。易燃物品(如酒精、二甲苯、乙和丙酮等)必須遠(yuǎn)離火源,妥善保存。 10.工作結(jié)束時(shí)檢查電器、酒精燈等是否關(guān)閉,觀察記錄培養(yǎng)箱、冰箱溫度及工作情況,用浸有消毒液的抹布將操作臺(tái)擦拭干凈,并將試劑、用具等放回原處,清理臺(tái)面,未污染的廢棄物扔進(jìn)污物桶,有菌廢棄物應(yīng)送高壓滅菌后處理。 11.離室前工作人員應(yīng)將雙手用消毒液消毒,并用肥皂和清水洗凈。 12.愛(ài)護(hù)儀器設(shè)備,經(jīng)常清潔,注意防塵和防潮。 關(guān)鍵詞:微生物室SOP
問(wèn):紫外燈管是什么玻璃材料做的?原理是什么?
答:紫外線殺菌燈基本常識(shí) --------------------------------------------------------(彭*) ----殺菌燈實(shí)際上是屬于一種低壓汞燈。低壓汞燈是利用較低汞蒸汽壓(<10-2Pa)被激化而發(fā)出紫外光,其發(fā)光譜線主要有兩條:一條是253.7nm波長(zhǎng);另一條是185nm波長(zhǎng),這兩條都是肉眼看不見(jiàn)的紫外線。 ----用來(lái)照明用的日光燈、節(jié)能燈也屬于低壓汞燈,依*低壓汞蒸汽被激發(fā)后發(fā)射紫外線,其中254nm波長(zhǎng)的紫外線照射到熒光粉上再發(fā)出可見(jiàn)光,如果改變熒光粉的成分和比例,它就可以發(fā)出我們通常所見(jiàn)的不同顏色的光。 ----殺菌燈不需要轉(zhuǎn)化為可見(jiàn)光,253.7nm的波長(zhǎng)就能起到很好的殺菌作用,這是因?yàn)榧?xì)胞對(duì)光波的吸收譜線有一個(gè)規(guī)律,在250~270nm的紫外線有zui大的吸收,被吸收的紫外線實(shí)際上作用于細(xì)胞遺傳物質(zhì)即DNA,它起到一種光化作用,紫外光子的能量被DNA中的堿基對(duì)吸收,引起遺傳物質(zhì)發(fā)生變異,使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖后代,達(dá)到殺菌的目的。 ----日光燈和節(jié)能燈使用普通玻璃做成的,253.7nm紫外線透不出來(lái),不能用做殺菌用的燈,石英玻璃對(duì)紫外線透過(guò)率高,達(dá)90%,是做殺菌燈的材料,但是石英玻璃的性能與普通玻璃在性能上有很大的差別(主要是熱膨脹系數(shù)不同),封接不能用普通的自動(dòng)化程度較高的圓封的辦法,這使得殺菌燈生產(chǎn)制造的技術(shù)含量要高于普通節(jié)能燈。 ----有一種透紫外線的玻璃,即通常所說(shuō)的高硼玻璃,它對(duì)紫外透過(guò)率約是石英玻璃的60%,它的生產(chǎn)工藝與節(jié)能燈一樣,使得它的成本與價(jià)格比石英玻璃生產(chǎn)的殺菌燈相差很遠(yuǎn),幾瓦的燈管只需幾元,但它在性能上遠(yuǎn)比不上石英殺菌燈。表現(xiàn)在如下幾方面: ---- 1、透過(guò)率不同,在同樣規(guī)格經(jīng)同樣鎮(zhèn)流器測(cè)試,石英玻璃殺菌燈紫外線強(qiáng)度是高硼玻璃殺菌燈的1.5倍以上; ---- 2、高硼玻璃燈紫外光強(qiáng)度很容易衰減,它點(diǎn)燈數(shù)百小時(shí)后其紫外光強(qiáng)度就大幅下降,降到初始時(shí)的50%-70%。在用戶(hù)手上,雖然看到燈管還是亮的,但它可能已不起作用了。而石英玻璃的光衰減程度要遠(yuǎn)小于高硼燈,如果生產(chǎn)工藝過(guò)關(guān),石英燈的光衰減在經(jīng)點(diǎn)燈2000-3000小時(shí),光衰減到初始時(shí)的80%-70%,以后只要燈不滅,光衰的幅度會(huì)越來(lái)越小。 ----國(guó)內(nèi)殺菌燈的客戶(hù)可能會(huì)了解菲利浦的殺菌燈,菲利浦有一種殺菌燈是用一種接近普通玻璃的玻璃生產(chǎn)的,而非石英玻璃制造的,其透光率接近石英玻璃的透過(guò)率,比中國(guó)的高硼玻璃燈要高得多,可使用自動(dòng)化程度較高的節(jié)能燈生產(chǎn)工藝生產(chǎn),這種燈主要依*他們煉制這種玻璃的技術(shù)。它的缺點(diǎn)是不能產(chǎn)生臭氧。 ----石英殺菌燈的另一個(gè)特點(diǎn)是可發(fā)出臭氧。由于石英玻璃對(duì)短波185nm的紫外線透過(guò)率也高,185nm的紫外線能電離空氣產(chǎn)生臭氧,臭氧濃度高對(duì)人體不利,但在無(wú)人場(chǎng)合時(shí)能使用,臭氧也能殺菌、消毒,恰好可彌補(bǔ)由于紫外線只沿直線傳播、消毒有死角的缺點(diǎn)。 ----有些場(chǎng)合不能有臭氧,也可使用石英殺菌燈,這種石英玻璃在煉制的時(shí)候就加了一種元素--鈦(Ti),使它透過(guò)紫外線在200nm以下發(fā)生截止,而對(duì)254nm紫外線透過(guò)基本無(wú)影響,即通常所說(shuō)的無(wú)臭氧殺菌燈。 ----從以上分析,做殺菌燈用石英玻璃是選擇。在國(guó)內(nèi),醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域,早已不推薦使用高硼殺菌燈,在美國(guó)、加拿大、日本生產(chǎn)紫外線殺菌燈普遍都采用石英玻璃。原理:現(xiàn)代紫外消毒技術(shù)是基于現(xiàn)代防疫學(xué)、光學(xué)、數(shù)學(xué)、生物學(xué)及物理化學(xué)的基礎(chǔ)上,利用特殊設(shè)計(jì)的率、高強(qiáng)度和長(zhǎng)壽命的C波段紫外光發(fā)生裝置產(chǎn)生的強(qiáng)紫外C光照射流水、空氣或固體表面,當(dāng)水、空氣或固體表面中的各種細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)、水藻以及其他病原體受到一定劑量的紫外C光輻射后,其細(xì)胞中的DNA結(jié)構(gòu)受到破壞(鍵斷裂,或光化學(xué)反應(yīng),如使DNA中THYMINE二聚等),從而在不使用任何化學(xué)藥物的情況下殺滅細(xì)菌、病毒以及其它致病體。達(dá)到了消毒和凈化的目的。
關(guān)鍵詞:紫外燈管
問(wèn):直接接種法和薄膜過(guò)濾法的區(qū)別
答:直接接種法取樣量少,方法繁瑣,且易受外源性細(xì)菌污染,對(duì)操作者和操作環(huán)境要求高,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可*性影響較大。薄膜過(guò)濾法采用大取樣量集菌的方法,具有代表性,不易漏檢,儀器操作簡(jiǎn)單。該系統(tǒng)是全封閉過(guò)濾系統(tǒng),避免了操作過(guò)程中外源性細(xì)菌的污染,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可*性影響較小。薄膜過(guò)濾法的缺限是集菌儀的價(jià)格較高,一次性使用的集菌培養(yǎng)器也是一項(xiàng)支出,所以較直接接種法而言,花費(fèi)的成本要高。相對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量而言,增加這點(diǎn)投入也是應(yīng)該的。
關(guān)鍵詞:直接接種法 薄膜過(guò)濾法 區(qū)別
問(wèn):05版藥典關(guān)于微生物限度檢查驗(yàn)證方法中提到驗(yàn)證試驗(yàn)至少應(yīng)進(jìn)行3次“獨(dú)立的平行試驗(yàn)”。請(qǐng)問(wèn)應(yīng)該如何理解“獨(dú)立的平行試驗(yàn)”?什么樣的情況算是“獨(dú)立平行”呢?如果設(shè)計(jì)3次試驗(yàn),試驗(yàn)時(shí)間能否重疊?試驗(yàn)條件能否共用?
答:時(shí)間可以重疊,試驗(yàn)條件也可以共用.先做一次獨(dú)立的試驗(yàn),然后后面兩次跟*次一樣. (1)試驗(yàn)組:取樣品加入xxx ml稀釋液中,混勻制成供試液,取供試液1ml和1ml50~ 100cfu試驗(yàn)菌,注入無(wú)菌平皿中,做2個(gè)平行。(2)菌液組:取1ml試驗(yàn)菌注入無(wú)菌平皿中,做2個(gè)平行,測(cè)定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。(3)供試品對(duì)照組:取1ml供試液注入無(wú)菌平皿中,做2個(gè)平行,測(cè)定供試品本底菌數(shù)。(4)傾注已融化并冷卻至45℃左右的xxx培養(yǎng)基于以上平皿中,待凝固后,倒置于xxxx℃培養(yǎng) xxxh,計(jì)數(shù)。(5)試驗(yàn)重復(fù)3次。
關(guān)鍵詞:獨(dú)立的平行試驗(yàn) 微生物限度檢查驗(yàn)證